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鈣成像
產(chǎn)品簡介


鈣離子是生物體內(nèi)最重要的信號信使之一,參與肌細胞收縮、腺細胞分泌、神經(jīng)遞質(zhì)釋放、細胞增殖、 分化和凋亡等過程,鈣離子濃度可以表征突觸傳遞和神經(jīng)元活動。


鈣離子成像是指利用鈣離子指示劑監(jiān)測細胞內(nèi)鈣離子濃度的方法。在神經(jīng)系統(tǒng)研究方面,在體(in vivo)或者離體(in vitro)實驗中,鈣成像技術被廣泛應用于同時監(jiān)測成百上千個神經(jīng)元內(nèi)鈣離子的變化,從而檢測神經(jīng)元的活動情況。



常見的可遺傳編碼鈣離子指示劑


鈣離子成像技術需要根據(jù)實驗要求選擇合適的鈣離子指示劑。廣泛使用的鈣離子指示劑有化學性鈣離子指示劑(Chemical Indicators)和基因編碼鈣離子指示劑(Genetically encoded calcium indicators,GECIs)兩類。

目前常用的基因編碼鈣離子指示劑就是將來自于綠色熒光蛋白(GFP)及其變異體(例如循環(huán)排列GFP、YFP、CFP)的熒光蛋白質(zhì),與鈣調(diào)蛋白(CaM)和肌球蛋白輕鏈激酶M13域融合。當鈣離子濃度上升時,會導致M13與CaM結合,從而改變cpEGFP的構象,將其從無熒光的狀態(tài)變?yōu)榫G色熒光。


image.png

其他可遺傳編碼鈣離子指示劑


XCaMP系列:

基于CaMKK為骨架,通過一系列的突變篩選,包括四種不同顏色:藍色的XCaMP-B,綠色的XCaMP-G,橙色的XCaMP-O和紅色的XCaMP-R。其中XCaMP-G的熒光強度比GCaMP6強,動作電位刺激誘發(fā)的鈣離子反應性能也比GCaMP6有明顯提高。結合特定的神經(jīng)元特異的表達方法,可實現(xiàn)在自由活動狀態(tài)下同時監(jiān)測特定行為中三種不同神經(jīng)元類型的活動;結合雙光子顯微鏡,進行微結構功能成像,實現(xiàn)對突觸前和突觸后結構同時雙色成像。


CaMPARI:

一種能夠兼顧全局和微觀的新型鈣成像技術,包含CaMPARI以及CaMPARI2(第二代)。 其原理在于,CaMPARI蛋白在正常狀態(tài)下會發(fā)出綠色熒光,而如果對這種蛋白同時使用高濃度鈣離子與紫外光處理,它就會不可逆、永久地轉(zhuǎn)變成另一種能發(fā)出紅色熒光的構象, 即實現(xiàn)將瞬間的神經(jīng)元活動變成永久的紅色熒光蛋白表達。研究人員通過轉(zhuǎn)基因技術將這種新型蛋白導入到實驗動物的神經(jīng)系統(tǒng)中,然后用高強度的紫外光照射動物的大腦,通過檢查熒光,找到發(fā)紅色熒光的神經(jīng)元,這些神經(jīng)元即是在紫外光照射期間活躍的神經(jīng)元。 由于紫外光可以對著整個大腦進行照射,所以理論上,人們可以對全腦進行檢查。


jRGECO1a&RcaMP:

紅色的鈣離子敏感蛋白,可以同GCaMP一起使用,標記同一小鼠同一腦區(qū)兩類細胞的活動不同的神經(jīng)元類型。


GCaMP-X:

無損傷鈣離子探針,可保護依賴于L型鈣通道的興奮-轉(zhuǎn)錄耦合免受干擾,同時仍表現(xiàn)出部分GCaMP的優(yōu)良Ca2+感應特性。適合超長時程鈣信號的監(jiān)測。


產(chǎn)品列表


以AAV為載體的GCaMP是超強的鈣離子指示劑,是目前廣泛應用的鈣離子研究工具,其突出優(yōu)勢是可以通過特異的啟動子和定位序列實現(xiàn)在特定類型細胞或亞細胞結構表達。


吉滿生物可根據(jù)您的成像實驗為您提供相應的鈣成像AAV載體。


吉滿ID質(zhì)粒名稱
7300GPAAV-hSyn1-mRuby2-GSG-P2A-GCaMP6f
7305GPAAV-hSyn1-GCaMP6s-P2A-nls-dTomato
7306GPAAV-hSyn1-GCaMP6f-P2A-nls-dTomato
7319GPAAV-CAG(CAGGSA)-Flex-GCaMP6f
8680GPAAV-CaMKII-GCaMP6f-P2A-nls-dTomato
9711GPAAV-hSyn-GCaMP6f
9712GPAAV-CaMKIIa-GCaMP6f
9713GPAAV-CAG(CAGGSA)-GCaMP6f
9714GPAAV-EF1a-DIO-GCaMP6f-P2A-nls-dTomato
9717GPAAV-CaMKIIa-GCaMP6s
9718GPAAV-CaMKIIa-GCaMP6s-P2A-nls-dTomato
9719GPAAV-CAG(CAGGSA)-GCaMP6s
9720GPAAV-EF1a-DIO-GCaMP6s
9721GPAAV-EF1a-DIO-GCaMP6f
9722GPAAV-EF1a-DIO-GCaMP6s-P2A-nls-dTomato
9736GPAAV-hSyn-FLEX-GCaMP6f
9738GPAAV-hSyn-GCaMP6s
9740GPAAV-hSyn-FLEX-GCaMP6s
9963GPAAV-hSyn-DIO-GCaMP6m
9965GPAAV-CaMKIIa-GCaMP6m
16144GPAAV-CMV-GCaMP6f
16145GPAAV-CMV-GCaMP6f-3×Flag
16146GPAAV-CMV-GCaMP6m-3×Flag
16147GPAAV-CMV-GCaMP6s-3×Flag



鈣成像
產(chǎn)品簡介


鈣離子是生物體內(nèi)最重要的信號信使之一,參與肌細胞收縮、腺細胞分泌、神經(jīng)遞質(zhì)釋放、細胞增殖、 分化和凋亡等過程,鈣離子濃度可以表征突觸傳遞和神經(jīng)元活動。


鈣離子成像是指利用鈣離子指示劑監(jiān)測細胞內(nèi)鈣離子濃度的方法。在神經(jīng)系統(tǒng)研究方面,在體(in vivo)或者離體(in vitro)實驗中,鈣成像技術被廣泛應用于同時監(jiān)測成百上千個神經(jīng)元內(nèi)鈣離子的變化,從而檢測神經(jīng)元的活動情況。



常見的可遺傳編碼鈣離子指示劑


鈣離子成像技術需要根據(jù)實驗要求選擇合適的鈣離子指示劑。廣泛使用的鈣離子指示劑有化學性鈣離子指示劑(Chemical Indicators)和基因編碼鈣離子指示劑(Genetically encoded calcium indicators,GECIs)兩類。

目前常用的基因編碼鈣離子指示劑就是將來自于綠色熒光蛋白(GFP)及其變異體(例如循環(huán)排列GFP、YFP、CFP)的熒光蛋白質(zhì),與鈣調(diào)蛋白(CaM)和肌球蛋白輕鏈激酶M13域融合。當鈣離子濃度上升時,會導致M13與CaM結合,從而改變cpEGFP的構象,將其從無熒光的狀態(tài)變?yōu)榫G色熒光。


image.png

其他可遺傳編碼鈣離子指示劑


XCaMP系列:

基于CaMKK為骨架,通過一系列的突變篩選,包括四種不同顏色:藍色的XCaMP-B,綠色的XCaMP-G,橙色的XCaMP-O和紅色的XCaMP-R。其中XCaMP-G的熒光強度比GCaMP6強,動作電位刺激誘發(fā)的鈣離子反應性能也比GCaMP6有明顯提高。結合特定的神經(jīng)元特異的表達方法,可實現(xiàn)在自由活動狀態(tài)下同時監(jiān)測特定行為中三種不同神經(jīng)元類型的活動;結合雙光子顯微鏡,進行微結構功能成像,實現(xiàn)對突觸前和突觸后結構同時雙色成像。


CaMPARI:

一種能夠兼顧全局和微觀的新型鈣成像技術,包含CaMPARI以及CaMPARI2(第二代)。 其原理在于,CaMPARI蛋白在正常狀態(tài)下會發(fā)出綠色熒光,而如果對這種蛋白同時使用高濃度鈣離子與紫外光處理,它就會不可逆、永久地轉(zhuǎn)變成另一種能發(fā)出紅色熒光的構象, 即實現(xiàn)將瞬間的神經(jīng)元活動變成永久的紅色熒光蛋白表達。研究人員通過轉(zhuǎn)基因技術將這種新型蛋白導入到實驗動物的神經(jīng)系統(tǒng)中,然后用高強度的紫外光照射動物的大腦,通過檢查熒光,找到發(fā)紅色熒光的神經(jīng)元,這些神經(jīng)元即是在紫外光照射期間活躍的神經(jīng)元。 由于紫外光可以對著整個大腦進行照射,所以理論上,人們可以對全腦進行檢查。


jRGECO1a&RcaMP:

紅色的鈣離子敏感蛋白,可以同GCaMP一起使用,標記同一小鼠同一腦區(qū)兩類細胞的活動不同的神經(jīng)元類型。


GCaMP-X:

無損傷鈣離子探針,可保護依賴于L型鈣通道的興奮-轉(zhuǎn)錄耦合免受干擾,同時仍表現(xiàn)出部分GCaMP的優(yōu)良Ca2+感應特性。適合超長時程鈣信號的監(jiān)測。


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以AAV為載體的GCaMP是超強的鈣離子指示劑,是目前廣泛應用的鈣離子研究工具,其突出優(yōu)勢是可以通過特異的啟動子和定位序列實現(xiàn)在特定類型細胞或亞細胞結構表達。


吉滿生物可根據(jù)您的成像實驗為您提供相應的鈣成像AAV載體。


吉滿ID質(zhì)粒名稱
7300GPAAV-hSyn1-mRuby2-GSG-P2A-GCaMP6f
7305GPAAV-hSyn1-GCaMP6s-P2A-nls-dTomato
7306GPAAV-hSyn1-GCaMP6f-P2A-nls-dTomato
7319GPAAV-CAG(CAGGSA)-Flex-GCaMP6f
8680GPAAV-CaMKII-GCaMP6f-P2A-nls-dTomato
9711GPAAV-hSyn-GCaMP6f
9712GPAAV-CaMKIIa-GCaMP6f
9713GPAAV-CAG(CAGGSA)-GCaMP6f
9714GPAAV-EF1a-DIO-GCaMP6f-P2A-nls-dTomato
9717GPAAV-CaMKIIa-GCaMP6s
9718GPAAV-CaMKIIa-GCaMP6s-P2A-nls-dTomato
9719GPAAV-CAG(CAGGSA)-GCaMP6s
9720GPAAV-EF1a-DIO-GCaMP6s
9721GPAAV-EF1a-DIO-GCaMP6f
9722GPAAV-EF1a-DIO-GCaMP6s-P2A-nls-dTomato
9736GPAAV-hSyn-FLEX-GCaMP6f
9738GPAAV-hSyn-GCaMP6s
9740GPAAV-hSyn-FLEX-GCaMP6s
9963GPAAV-hSyn-DIO-GCaMP6m
9965GPAAV-CaMKIIa-GCaMP6m
16144GPAAV-CMV-GCaMP6f
16145GPAAV-CMV-GCaMP6f-3×Flag
16146GPAAV-CMV-GCaMP6m-3×Flag
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