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質(zhì)粒構(gòu)建服務(wù)
簡(jiǎn)介

質(zhì)粒(Plasmid)—— 基因工程中最常見的運(yùn)載體。是一種相對(duì)分子質(zhì)量較小、獨(dú)立于染色體DNA之外的環(huán)狀DNA。

質(zhì)粒載體是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上為適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室操作而進(jìn)行人工構(gòu)建的質(zhì)粒。與天然質(zhì)粒相比,質(zhì)粒載體通常帶有一個(gè)或一個(gè)以上的選擇性標(biāo)記基因(如抗生素抗性基因)和一個(gè)人工合成的含有多個(gè)限制性內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)的多克隆位點(diǎn)序列,并去掉了大部分非必需序列,使分子量盡可能減少,以便于基因工程操作。

大量獲取質(zhì)粒可以通過(guò)質(zhì)粒擴(kuò)增的方式,其方法通常包括將細(xì)菌質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌(感受態(tài))中,然后借助大腸桿菌的搖菌擴(kuò)增實(shí)現(xiàn)質(zhì)粒的擴(kuò)增,再通過(guò)抽提的方式收獲大量質(zhì)粒。質(zhì)粒擴(kuò)增需要的源頭質(zhì)粒量非常小,1ug的質(zhì)粒已經(jīng)能夠滿足擴(kuò)增的需要,這也使得質(zhì)粒的重復(fù)使用變得非常容易,因此質(zhì)粒發(fā)貨后無(wú)序列問(wèn)題不退不換。

質(zhì)粒.png

質(zhì)粒DNA示意圖

特點(diǎn)
穩(wěn)定且可易擴(kuò)增
閉合環(huán)狀雙連DNA分子,它很穩(wěn)定;攜帶外源DNA片段的質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞后,在細(xì)胞中進(jìn)行自我復(fù)制,或整合到染色體DNA上,隨染色體DNA同步復(fù)制。
可瞬轉(zhuǎn)可穩(wěn)轉(zhuǎn)
可瞬時(shí)表達(dá)發(fā)揮時(shí)間短,也可以構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)株。可對(duì)于易轉(zhuǎn)染的細(xì)胞可通過(guò)轉(zhuǎn)染試劑侵染細(xì)胞,難轉(zhuǎn)染細(xì)胞可通過(guò)電轉(zhuǎn)的方法;可以瞬時(shí)表達(dá),也可以構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)株,但耗時(shí)長(zhǎng)。
容載序列長(zhǎng)
經(jīng)過(guò)構(gòu)建后的普通載體可容納較長(zhǎng)的目的基因。除外源shRNA和較短cDNA片段,普通質(zhì)粒也可容納較長(zhǎng)cDNA片段,更好的研究上調(diào)較長(zhǎng)編碼基因或非編碼基因等后引起的細(xì)胞表型變化。
服務(wù)流程
優(yōu)勢(shì)

(1)吉滿生物具有專業(yè)的技術(shù)研究團(tuán)隊(duì)和豐富的分子克隆經(jīng)驗(yàn);

(2)吉滿生物目前已有多種工具載體可選,應(yīng)用于各種表達(dá)系統(tǒng);

(3)可根據(jù)客戶需求構(gòu)建不同的目的載體。

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質(zhì)粒(Plasmid)—— 基因工程中最常見的運(yùn)載體。是一種相對(duì)分子質(zhì)量較小、獨(dú)立于染色體DNA之外的環(huán)狀DNA。

質(zhì)粒載體是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上為適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室操作而進(jìn)行人工構(gòu)建的質(zhì)粒。與天然質(zhì)粒相比,質(zhì)粒載體通常帶有一個(gè)或一個(gè)以上的選擇性標(biāo)記基因(如抗生素抗性基因)和一個(gè)人工合成的含有多個(gè)限制性內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)的多克隆位點(diǎn)序列,并去掉了大部分非必需序列,使分子量盡可能減少,以便于基因工程操作。

大量獲取質(zhì)粒可以通過(guò)質(zhì)粒擴(kuò)增的方式,其方法通常包括將細(xì)菌質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌(感受態(tài))中,然后借助大腸桿菌的搖菌擴(kuò)增實(shí)現(xiàn)質(zhì)粒的擴(kuò)增,再通過(guò)抽提的方式收獲大量質(zhì)粒。質(zhì)粒擴(kuò)增需要的源頭質(zhì)粒量非常小,1ug的質(zhì)粒已經(jīng)能夠滿足擴(kuò)增的需要,這也使得質(zhì)粒的重復(fù)使用變得非常容易,因此質(zhì)粒發(fā)貨后無(wú)序列問(wèn)題不退不換。

質(zhì)粒.png

質(zhì)粒DNA示意圖

特點(diǎn)
穩(wěn)定且可易擴(kuò)增
閉合環(huán)狀雙連DNA分子,它很穩(wěn)定;攜帶外源DNA片段的質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞后,在細(xì)胞中進(jìn)行自我復(fù)制,或整合到染色體DNA上,隨染色體DNA同步復(fù)制。
可瞬轉(zhuǎn)可穩(wěn)轉(zhuǎn)
可瞬時(shí)表達(dá)發(fā)揮時(shí)間短,也可以構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)株。可對(duì)于易轉(zhuǎn)染的細(xì)胞可通過(guò)轉(zhuǎn)染試劑侵染細(xì)胞,難轉(zhuǎn)染細(xì)胞可通過(guò)電轉(zhuǎn)的方法;可以瞬時(shí)表達(dá),也可以構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)株,但耗時(shí)長(zhǎng)。
容載序列長(zhǎng)
經(jīng)過(guò)構(gòu)建后的普通載體可容納較長(zhǎng)的目的基因。除外源shRNA和較短cDNA片段,普通質(zhì)粒也可容納較長(zhǎng)cDNA片段,更好的研究上調(diào)較長(zhǎng)編碼基因或非編碼基因等后引起的細(xì)胞表型變化。
服務(wù)流程
優(yōu)勢(shì)

(1)吉滿生物具有專業(yè)的技術(shù)研究團(tuán)隊(duì)和豐富的分子克隆經(jīng)驗(yàn);

(2)吉滿生物目前已有多種工具載體可選,應(yīng)用于各種表達(dá)系統(tǒng);

(3)可根據(jù)客戶需求構(gòu)建不同的目的載體。

Tel: 400-627-9288
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